Бюлетень "Ветеринарна біотехнологія"

  • Друк

Ветеринарна біотехнологія. – 2018. – Вип. 32(1). – С. 44–49. https://doi.org/10.31073/vet_biotech32(1)-3

БІЛОЙВАН О.В., аспірант, e-mail: Ця електронна адреса захищена від спам-ботів. вам потрібно увімкнути JavaScript, щоб побачити її., СТЕГНІЙ Б.Т., д-р вет. наук, проф., академік НААН України, e-mail: Ця електронна адреса захищена від спам-ботів. вам потрібно увімкнути JavaScript, щоб побачити її., СОЛОДЯНКІН О.С., канд. біол. наук, e-mail: Ця електронна адреса захищена від спам-ботів. вам потрібно увімкнути JavaScript, щоб побачити її., ГЕРІЛОВИЧ А.П., д-р вет. наук, проф., чл.-кор. НААН України, e-mail: Ця електронна адреса захищена від спам-ботів. вам потрібно увімкнути JavaScript, щоб побачити її.

Національний науковий центр «Інститут експериментальної та клінічної ветеринарної медицини», м. Харків

РОЗРОБКА ПОЗИТИВНИХ ПЛР-КОНТРОЛІВ ДЛЯ ВИЯВЛЕННЯ ПЛАЗМІД BACILLUS ANTHRACIS pXO1 ТА pXO2

   В статті наведено результати виготовлення рекомбінантних позитивних контрольних зразків для детекції плазмід pXO1 та pXO2 збудника сибірки за методом ТА-клонування та з використанням плазмідного вектора pTZ57R/T. Фрагменти генів pagA плазміди pXO1 та capC плазміди pXO2 були ампліфіковані методом ПЛР, мали довжину 201 та 171 п.н. відповідно та вбудовані до складу вектору pTZ57R/T. Було здійснено трансформацію компетентних клітин E.coli штаму DH5α отриманими ДНК. За результатами фінальної ПЛР доведено, що отримані рекомбінантні контрольні зразки придатні для використання та можуть бути включені до складу діагностичних наборів для детекції генетичного матеріалу вищезазначеного збудника.

Ключові слова: сибірка, плазміди, ДНК, клонування.

СПИСОК ЛІТЕРАТУРИ

  1. Бойко О.П. Наявність спільних неблагополучних пунктів щодо сибірки та емфізематозного карбункулу – об’єктивна підстава для асоційованої імунізації тварин проти цих інфекцій (на прикладі західних областей України) / О.П. Бойко // Науково-технічний бюлетень Інституту біології тварин і Державного науково-дослідного контрольного інституту ветпрепаратів та кормових добавок. – 2013. – Вип. 14, № 3–4. – С. 121–126.
  2. Скрипник В.Г. Стан біологічної безпеки щодо сибірки в Україні / В.Г. Скрипник, М.В. Безименний, А.В. Скрипник // Ветеринарна медицина. – 2012. – Вип. 96. – С. 58–60.
  3. Preparation of a Positive Control DNA for Molecular Diagnostics / S. Inoue, A. Noguchi, K. Tanabayashi, A. Yamada // Japanese Journal of Infectious Diseases. – 2004. – Vol. 57. – P. 29–32.
  4. Bragg T.S. Nucleotide sequence and analysis of the lethal factor gene (lef) from B. anthracis / T.S. Bragg, D.L. Robertson // Gene. – 1989. – Vol. 81. – P. 45–54.
  5. Sequence assembly and analysis of pXO1 and pXO2 / R. Okinaka, K. Cloud, O. Hampton, A. Hoffmaster, K. Hill, P. Keim, T. Koehler, G. Lamke, S. Kumano, D. Manter, Y. Martinez, D. Ricke, R. Svensson, P. Jacksonat // Journal of Applied Microbiology. – 1999. – Vol. 87. – P. 261–262.
  6. Ezzell J.W. Immunoelectrophoretic analysis, toxicity and kinetics of in vitro production of the protective antigen and lethal factor components of B. anthracis toxin / J.W. Ezzell, B.E. Ivins, S.H. Leppla // Infection and immunity. – 1984. – Vol. 45. – P. 761–767.
  7. Real-time PCR system targeting a chromosomal marker specific for Bacillus anthracis / M.H. Antwerpen, P. Zimmermann, K. Bewley, D. Frangoulidis, H. Meyer // Molecular and Cellular Probes. – 2008. – Vol. 22. – P. 313–315.
  8. Rapid detection method for Bacillus anthracis using a combination of multiplexed real-time PCR and pyrosequencing and its application for food biodefense / T.W. Janzen, T.C. Matthew, N. Goji, M.J. Shields, K.R. Hahn, K.K. Amoako // Journal of Food Protection. – 2015. – Vol. 78. – P. 355–361.

Повний текст статті у форматі PDF